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摘要：

本品為15種氨基酸和2種雙肽配制而成的滅菌水溶液，使用Biochrom30+全自動(dòng)氨基酸分析儀對其所含的游離氨基酸組成進(jìn)行分析。結(jié)果表明該復(fù)方氨基酸雙肽注射液中氨基酸總量的濃度分別為：

樣品1：7190.178umol/mL；

樣品2：7258.812 umol/mL。

單個(gè)氨基酸含量，分別見附頁結(jié)果表。

一、樣品前處理

1、所用試劑

1.1 Loading Buffer：鋰鹽系統(tǒng)，pH 2.2

1.2 0.06mol/L 鹽酸：取50mL 鹽酸加水稀釋至10mL,混勻

1.3 17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品

2、 前處理設(shè)備

1）分析天平:精度為 0.0001g

2）移液槍及槍頭

3）0.22um濾膜

4）一次性注射器

5）低范圍pH試紙

3、樣品制備（參考2020中國藥典二部）

將樣品（注射液）吸取適量體積后，用Loading Buffer將其稀釋至合適濃度。蘸取少量稀釋后溶液至pH試紙上，觀察其的pH值是否達(dá)到2.2?？捎?.1、1.2試劑調(diào)節(jié)樣品pH值至合適。

移液槍取上述溶液1mL至一次性注射劑，過濾膜，上機(jī)待測。

二、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析儀分析方法參數(shù)：

1）色譜柱：Biochrom Li型陽離子交換樹脂柱，4.6′20cm

2）分離程序：

3）運(yùn)行時(shí)間：經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 168min

4）反應(yīng)單元溫度：135°C。

5）檢測波長：570nm、440nm同時(shí)檢測。

三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算

樣品測定液氨基酸的含量按式(1)計(jì)算:

Ci = Cs/As × Ai× F ……………………(1)式中:

Ci ———樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Cs ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Ai ———試樣測定液氨基酸i的峰面積;

As ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

F ———樣品稀釋倍數(shù)。

附、復(fù)方氨基酸雙肽注射液分析圖譜及做樣結(jié)果

圖1.  樣品1 稀釋50倍